1 动物试验

1.1 原理 

    本方法是以高热量食物诱发动物肥胖，再给予受试样品（肥胖模型），或在给予高热量食物同时给予受试样品（预防肥胖模型），观察动物体重、体内脂肪含量的变化。

1.2 仪器

    动物天平，解剖器械等。

1.3 实验方法

1.3.1 实验动物 

    选用雄性大鼠，体重100－180g，每组8-12只。

1.3.2剂量分组及受试样品给予时间

实验设三个剂量组和一个空白对照组，以人体推荐量的5倍为其中的一个剂量组，另设二个剂量组，必要时设阳性对照组。受试样品给予时间30天，必要时可延长至45天。

1.3.3营养饲料配方：基础饲料 80％、猪油10％、蛋黄粉10％

1.3.4 实验步骤

1.3.4.1肥胖模型法

用营养饲料喂大鼠45天后，其体重增重比普通饲料喂养的同龄大鼠增加，差异有显著性，则肥胖模型建立。大鼠肥胖模型建立以后，将动物随机分为模型对照组及三个受试样品实验组，实验组给予不同剂量的受试样品，模型对照组给予相应溶剂。实验期间计录每只动物的给食量、剩食量及撒食量，定期称体重（每周称体重2次），实验结束时称体重，剖腹取体脂（睾丸及肾周脂肪垫）并称重，计算脂/体比。

1.3.4.2预防肥胖模型法

将动物随机分为空白对照组、模型对照组及三个受试样品实验组，自实验开始，模型对照组、实验组每只动物每日给予等量的营养饲料（饲料给予量以多数动物吃完为原则），空白对照组以相同方式给予基础饲料，饲料给予量与营养饲料相同。实验组给不同剂量的受试样品，对照组给予相应溶剂。实验期间计录每只动物的给食量、剩食量及撒食量，定期称体重（每周称体重2次），试验结束时称体重，剖腹取体脂（睾丸及肾周脂肪垫）并称重，计算脂/体比。

1.3.5.观察指标

体重、摄食量、食物利用率、体内脂肪重量（睾丸及肾周围脂肪垫）、脂/体比

1.4 数据处理和结果判定

一般采用方差分析，但需按方差分析的程序先进行方差齐性检验，方差齐，计算F值，F值< F0.05,结论：各组均数间差异无显著性；F值≥F0.05,P≤0.05,用多个实验组和一个对照组间均数的两两比较方法进行统计；对非正态或方差不齐的数据进行适当的变量转换，待满足正态或方差齐要求后，用转换后的数据进行统计；若变量转换后仍未达到正态或方差齐的目的，改用秩和检验进行统计。采用方差分析加Q检验进行统计。

实验组的体重和体内脂肪重量，或体重和脂/体比低于模型对照组，差异有显著性，摄食量不显著低于模型对照组，可判定该受试样品动物减肥功能实验结果阳性。

2 人体试食试验

2.1 原理

   单纯性肥胖受试者食用受试样品，观察体重、体内脂肪含量的变化及对机体健康有无损害。

2.2 仪器

    体成分测定设备、功率自行车、心率监测器、B超、皮卡钳、体重计。

2.3 试验方法

2.3.1 受试者纳入标准   

    受试对象为单纯性肥胖人群，成人BMI≥30，或总脂肪百分率达到男>25％，女>30％的自愿受试者。儿童及青少年实测体重超过标准体重的20％。

2.3.2 受试者排除标准

2.3.2.1 合并有心、肝、肾和造血系统等严重疾病，精神病患者。

2.3.2.2 短期内服用与受试功能有关的物品，影响到对结果的判断者。

2.3.2.3未按规定食用受试样品，无法判定功效或资料不全影响功效或安全性判断者。

2.3.3 试验设计及分组要求

不替代主食的减肥功能食品采用自身对照及组间对照试验设计。按受试者的体重、体脂重量随机分为试食组和对照组，尽可能考虑影响结果的主要因素如年龄、性别、饮食、运动状况等，进行均衡性检验，以保证组间的可比性。每组受试者不少于50例。替代主食的减肥功能食品只设单一试食组。

2.3.4 受试样品的剂量和使用方法

不替代主食的减肥功能食品：试食组按推荐服用方法、服用量服用受试产品，对照组可服用安慰剂或采用阴性对照。按盲法进行试食试验。受试样品给予时间35天，必要时可以延长至60天。

替代主食的减肥功能食品：受试者按推荐方法和推荐剂量服用受试样品，受试样品给予时间35天，必要时可以延长至60天。

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