1 范围
本方法规定了代谢试验的基本技术要求。
本方法适用于评价我国用于保健食品创新的化学物质，或需要进行三个阶段毒性试验包括已知化学物质或与已知化学物质结构基本相同的衍生物在体内的代谢转化途径及转归。
 
    2 原理
受试物在体内可发生一系列复杂的生化变化。受试物经胃肠道吸收后通过血液转运到全身各组织器官，再经过生物转化，由各种途径排出体外。因此，受试物原形物在逐渐被代谢降解，而其代谢产物不断生成。测定灌胃后不同时间内受试物原形物或其代谢物在血液、组织或排泄物中的含量，以了解该受试物在动物体内的毒代动力学特征，包括吸收、分布、消除的特点，组织蓄积及可能作用的靶器官等，根据数学模型，求出各项毒代动力学参数。同时采用分离纯化方法确定主要代谢产物的化学结构，测试其毒性并推测受试物在体内的具体代谢途径。通过本实验的观察，对受试物在体内的过程可作出正确评价，为阐明该受试物的毒作用性质与程度提供科学依据。
 
    3 仪器与试剂
3.1 根据实验室条件，配备高效薄层色谱、高效液相色谱、气相色谱、气质联用及紫外光、荧光检测等仪器设备。
3.2 放射性测量仪器：液体闪烁计数仪及闪烁液。
3.3 实验室常用仪器与试剂。
 
    4 试验动物
原则上应尽量使用与人具有相同代谢途径的动物种系。一般选用两种性别、体重为22-28g 成年小鼠或170～200g大鼠。试验开始时动物体重的差异应不超过平均体重的±20％ 。
 
    5 剂量及分组
选用低于最大未观察到有害作用剂量，需要时可用高、低二种剂量。可单次或多次给予受试物。如采用标记化合物，除确定化学剂量外，放射性剂量一般小鼠为10～20 mCi/只（0.4～0.8 MBq/只）、大鼠100～250 mCi/kg（4～9 MBq/只）。
 
    6 操作步骤
6.1受试物配制: 一般用蒸馏水作溶剂，如受试物不溶于水，可用食用油、医用淀粉、羧甲基纤维素配成乳化液或悬浮液。受试物应于灌胃前新鲜配制，除非有资料表明以溶液（或悬浊液、乳浊液等）保存具有稳定性。
6.2 给受试物途径：以灌胃为主，灌胃前动物禁食16～18 h，自由饮水。进行毒代动力学分析时，最好同时采用灌胃和静脉注射。
6.3 试验项目：进行代谢试验前，需建立测定生物样品中受试物含量的微量化学分析方法或标记受试物的同位素示踪方法。
6.3.1 血浆中受试物含量或放射性水平的测定：于动物灌胃后6～10个不同的时相采血，
每个时相的动物数不应少于3只。结果以每mL血浆中受试物含量或放射性强度为纵坐标，时间为横坐标，在半对数纸上作药－时曲线。如以化学分析方法测定受试物含量，用已编制的药代动力学计算机程序进行曲线拟合，按房室模型求出毒代动力学方程及各项代谢动力学参数。如用同位素示踪法测定血浆总放射性水平，作代谢动力学分析时应谨慎。
6.3.2 胃肠道吸收：于灌胃后不同时间处死动物，取出胃肠道及其内容物（包括粪）作成匀浆，测定受试物含量或放射性水平，以灌胃后即刻处死动物的胃肠道回收量为100％，分别观察不同时相的各组动物中受试物或放射性自胃肠道消失的情况。以上述不同时相回收量的百分数为纵坐标，时间为横坐标，在半对数纸上作图，求得受试物或放射性在胃肠道的消失速率。为确定受试物在胃肠道的消失速率是否能反映在体内的吸收情况，需进行离体胃肠道温孵试验，即将受试物注入离体胃肠道后结扎两端，于37℃ Kreb's 液中振荡温孵1 h，测定受试物的回收率，以观察受试物在胃肠道内有无受到破坏，由此估计受试物在胃肠道的吸收速率。
6.3.3 主要器官和组织中的分布：于灌胃后取2～3个不同时相处死动物，对肝、肾、脑等器官和组织进行受试物含量或放射性测定，以找出受试物含量最高的组织和时间。

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