一、鉴别试验
1. 试剂：1克香荚兰素溶于100ml盐酸中，用时现配。
2. 鉴别方法：取10ml样品溶液（4%）放蒸发皿中蒸干，然后滴加香荚兰盐酸溶液生成樱桃红色。这是儿茶素类化合物的特异显色剂，不受花色素和黄酮甙的干扰，具专属性，缺儿茶素的样品呈阴性。
二、含量测定：
1. 原理多酚类物质能与亚铁离子生成蓝紫色络合物。用分光光度法测定其含量。
2. 试剂
2.1 酒石酸铁溶液：称硫酸亚铁（FeSO4.7H2O）1g酒石酸钾钠（KNaC4 H4O6.4H2 O）5g加水溶解并定容至1L，此液可稳定10天。
2.2 pH7.5的索伦逊缓冲液（先配制以下两种溶液）a 1/15 M的磷酸氢二钠溶液：称取Na2HPO4.12H O23.877g，加水溶解并稀释至1L。b 1/15M的磷酸二氢钾溶液：称取经110℃烘干2h的KH2PO49.078g，加水溶解至1L。取溶液a 85ml和溶液b 15ml混匀，即得pH7.5的缓冲液。
2.3 茶多酚标准溶液秤取茶多酚标准0.2000g，加溶解并稀释至100.0mL。
3. 测定方法
3.1 茶多酚标准曲线制备：
分别吸取茶多酚标准溶液（2mg/ml）：0，0.2，0.4，0.6，0.8，1.0ml分别盛放25.0ml的比色管中，加水1.0ml，再加4.0ml水，然后加5.0ml酒石酸铁溶液，加PH7.5缓冲液至刻度，摇匀，放540nm比色。
4. 样品测定：
称取一定量样品（约1g），用水溶解至25.0mL，经过滤，弃去初滤液，吸取0.5ml滤液放25ml的比色管中，加0.5ml水，再加4.0ml水，然后加5.0ml酒石酸铁溶液，然后用PH7.5缓冲液稀释至刻度。与标准管同时比色测定。
5. 计算：
X=C×V1 /V2/m×100/1000
式中
X：样品中茶多酚含量g/100g；
V1：样品溶液总体积mL；
V2：测定用样品溶液体积mL；
m：样品质量g。 |
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